Флуарэсцэнтная мікраскапія зрабіла рэвалюцыю ў нашай здольнасці візуалізаваць і вывучаць біялагічныя ўзоры, дазволіўшы нам паглыбіцца ў заблытаны свет клетак і малекул. Ключавым кампанентам флуарэсцэнтнай мікраскапіі з'яўляецца крыніца святла, якая выкарыстоўваецца для ўзбуджэння флуарэсцэнтных малекул ва ўзоры. На працягу многіх гадоў выкарыстоўваліся розныя крыніцы святла, кожная са сваімі унікальнымі характарыстыкамі і перавагамі.
1. Ртутная лямпа
Ртутная лямпа высокага ціску магутнасцю ад 50 да 200 Вт выраблена з кварцавага шкла і мае сферычную форму. Унутры ён змяшчае пэўную колькасць ртуці. Пры яго працы паміж двума электродамі ўзнікае разрад, у выніку чаго ртуць выпараецца, і ўнутраны ціск у сферы хутка расце. Звычайна гэты працэс займае ад 5 да 15 хвілін.
Выпраменьванне ртутнай лямпы высокага ціску адбываецца ў выніку распаду і аднаўлення малекул ртуці падчас разраду электрода, што прыводзіць да выпраменьвання светлавых фатонаў.
Ён выпраменьвае моцнае ультрафіялетавае і сіне-фіялетавае святло, што робіць яго прыдатным для ўзбуджэння розных флуоресцентных матэрыялаў, таму ён шырока выкарыстоўваецца ў флуоресцентной мікраскапіі.
2. Ксенонавыя лямпы
Яшчэ адной часта выкарыстоўванай крыніцай белага святла ў флуарэсцэнтнай мікраскапіі з'яўляецца ксенонавая лямпа. Ксенонавыя лямпы, як і ртутныя лямпы, забяспечваюць шырокі спектр даўжынь хваль ад ультрафіялетавага да блізкага інфрачырвонага. Аднак яны адрозніваюцца спектрамі ўзбуджэння.
Ртутныя лямпы канцэнтруюць выпраменьванне ў ультрафіялетавым, сінім і зялёным дыяпазонах, што забяспечвае генерацыю яркіх флуарэсцэнтных сігналаў, але мае моцную фотатаксічнасць. Такім чынам, лямпы HBO звычайна зарэзерваваны для фіксаваных узораў або слабай флуарэсцэнтнай візуалізацыі. Наадварот, крыніцы ксенонавых лямпаў маюць больш гладкі профіль узбуджэння, што дазваляе параўноўваць інтэнсіўнасць на розных даўжынях хваль. Гэтая характарыстыка з'яўляецца выгаднай для такіх прыкладанняў, як вымярэнне канцэнтрацыі іёнаў кальцыя. Ксенонавыя лямпы таксама дэманструюць моцнае ўзбуджэньне ў блізкім інфрачырвоным дыяпазоне, асабліва каля 800-1000 нм.
Лямпы XBO маюць наступныя перавагі перад лямпамі ГБО:
① Больш аднастайная спектральная інтэнсіўнасць
② Мацнейшая спектральная інтэнсіўнасць у інфрачырвоным і сярэднім інфрачырвоным дыяпазонах
③ Большы выхад энергіі, што палягчае дасягненне дыяфрагмы аб'ектыва.
3. Святлодыёды
У апошнія гады ў галіне флуарэсцэнтных крыніц святла для мікраскапіі з'явіўся новы прэтэндэнт: святлодыёды. Перавага святлодыёдаў заключаецца ў хуткім уключэнні і выключэнні за мілісекунды, скарачэнні часу экспазіцыі ўзору і падаўжэнні тэрміну службы далікатных узораў. Акрамя таго, святлодыёднае святло дэманструе хуткае і дакладнае згасанне, значна зніжаючы фотатаксічнасць падчас доўгатэрміновых эксперыментаў з жывымі клеткамі.
У параўнанні з крыніцамі белага святла святлодыёды звычайна выпраменьваюць у больш вузкім спектры ўзбуджэння. Тым не менш, даступныя некалькі дыяпазонаў святлодыёдаў, што дазваляе выкарыстоўваць шматколерныя флуарэсцэнтныя прымянення, што робіць святлодыёды ўсё больш папулярным выбарам у сучасных устаноўках флуарэсцэнтнай мікраскапіі.
4. Лазерная крыніца святла
Лазерныя крыніцы святла вельмі манахраматычныя і накіраваныя, што робіць іх ідэальнымі для мікраскапіі з высокім разрозненнем, у тым ліку метадаў звышраздзялення, такіх як STED (стымуляванае знясіленне выпраменьвання) і PALM (фотаактываваная лакалізацыйная мікраскапія). Лазернае святло звычайна выбіраецца ў адпаведнасці з пэўнай даўжынёй хвалі ўзбуджэння, неабходнай для мэтавага флюарафора, забяспечваючы высокую селектыўнасць і дакладнасць узбуджэння флуарэсцэнцыі.
Выбар крыніцы святла для флуарэсцэнтнага мікраскопа залежыць ад канкрэтных эксперыментальных патрабаванняў і характарыстык узору. Калі вам спатрэбіцца дапамога, не саромейцеся звяртацца да нас
Час публікацыі: 13 верасня 2023 г